龙胆苦苷含量测定:照高效液相色谱法(《中华人民共和国药典》2010版 附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(25:75)为流动相;检测波长为270nm。理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备 取龙胆苦苷对照品适量, 精密称定,加甲醇制成每l ml 含0.2mg的溶液,即得。供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约0.5g,精密称定,精密加人甲醇20ml,称定重量,加热回流15分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,滤液备用,精密量取续滤液2ml ,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注人液相色谱仪,测定,即得。本品按干燥品计算,龙胆含龙胆苦苷(C 1 6 H 2 0 9 )不得少于3. 0% ;坚龙胆含龙胆苦苷(C1S H 2 O s ) 不得少于1.5%
对免疫功能的影响:腹腔注射瑞香素100mg/kg,能使小鼠胸腺和脾脏萎缩,胸、脾指数分别下降51.1%和20.6%,并与剂量呈正相关。瑞香素可明显降低小鼠血清凝集素滴度和溶血素效价,抑制小鼠对SRBC免疫应答反应,降低溶血空斑形成细胞值(PFC)。其对SRBC诱发的小鼠足垫迟发超敏反应(DTH)的抑制作用与给药剂量呈明显正相关,尚可显著增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数。
抗卡氏肺孢子虫包囊和滋养体作用:瑞香素在体外有一定的抗卡氏肺孢子虫包囊和滋养体的作用,这种作用呈剂量依赖关系,在1~20μmol/L的浓度范围内,随药物浓度增加,抑制Pc生长的效应越大,对虫体的线粒体、内质网等超微结构有影响,可以引起线粒体、内质网肿胀,胞浆溶解并产生空泡。瑞香素可以与Fe2+ 以2:1比例螯合而很少与Mg2+ 螯合,用FeSO4预先同瑞香素螯合后,它可大大减弱对Pc生长影响,而预先用MgSO4处理的瑞香素对Pc的生长影响无明显改变。提示瑞香素抗Pc的作用原理是螯合与Pc代谢密切相关的Fe,从而影响Pc的生长代谢。